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MTT檢測技術服務

簡要描(miao)述:四甲(jia)基偶氮唑鹽比(bi)色法(fa)(MTT方法(fa)),是通過快速簡便的顏色反應來(lai)檢(jian)測細(xi)胞存活數量。其原理(li)是MTT可作為(wei)哺乳類動物細(xi)胞線(xian)(xian)粒體中(zhong)琥(hu)珀(po)酸脫氫酶(mei)的底物。當有(you)活細(xi)胞存在(zai)時,線(xian)(xian)粒體內琥(hu)珀(po)酸脫氫酶(mei)可將淡黃色的MTT還原成藍紫(zi)色的針狀甲(jia)月(yue)替(Formazan)結晶并(bing)沉積在(zai)細(xi)胞中(zhong),結晶物能被二甲(jia)基亞砜(feng) (DMSO)溶解,用酶(mei)聯免疫檢(jian)測儀在(zai)570nm波(bo)長處測定其吸光度OD值,OD值的高低可間接反映活細(xi)胞的數量及其活性(xing)。

  • 產(chan)品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新(xin)時間:2023-07-19
  • 訪  問  量(liang):1442

MTT細胞活性檢測服務

四(si)甲基偶氮唑(zuo)鹽比色(se)(se)法(MTT方(fang)法),是通過快速簡(jian)便的顏色(se)(se)反應來檢測細胞存活(huo)數(shu)量。其(qi)(qi)原(yuan)理是MTT可作(zuo)為(wei)哺乳類動(dong)物(wu)細胞線(xian)粒體中琥珀(po)酸脫氫酶(mei)的底(di)物(wu)。當有活(huo)細胞存在時,線(xian)粒體內琥珀(po)酸脫氫酶(mei)可將淡黃色(se)(se)的MTT還原(yuan)成藍紫色(se)(se)的針(zhen)狀甲月替(Formazan)結晶并沉積在細胞中,結晶物(wu)能被(bei)二甲基亞砜 (DMSO)溶解,用(yong)酶(mei)聯免疫檢測儀在570nm波長(chang)處(chu)測定(ding)其(qi)(qi)吸光度OD值,OD值的高低可間接(jie)反映活(huo)細胞的數(shu)量及(ji)其(qi)(qi)活(huo)性。

MTT法常用的研究:

1、檢測細胞活性:常作為細胞毒性試(shi)驗的一(yi)種(zhong)方法。

2、體外藥(yao)物(wu)敏感實驗:該(gai)方法(fa)簡便、經濟、快速,重復性好,所需的(de)細胞數較少,沒有放射性,目前(qian)(qian)廣泛的(de)用于臨床前(qian)(qian)的(de)抗(kang)癌藥(yao)物(wu)的(de)篩(shai)選研究。

3、一些細胞因子(zi)活性的研究

實驗步驟:

1)將對數生長期細胞(bao)用胰酶消化后配制成濃度為1-10×104個(ge)/ml的(de)細胞(bao)懸液,按1000-10000個(ge)細胞(bao)/孔(kong)接種(zhong)于96孔(kong)板(ban),每孔(kong)加100μl。

2)將平板置(zhi)37℃、 5%CO2濕度(du)培養(yang)箱中24小時(shi)后,加(jia)入含有(you)不(bu)(bu)同濃度(du)受試樣(yang)本的(de)培養(yang)液100μl,每(mei)個樣(yang)本不(bu)(bu)同濃度(du)設(she)平行的(de)三個孔,對照組(zu)加(jia)不(bu)(bu)含樣(yang)本的(de)培養(yang)液100μl,再(zai)放入培養(yang)箱中孵育24-72 小時(shi),

3)用(yong)(yong)快速(su)翻板法(fa)倒掉(diao)培養(yang)液,每(mei)孔(kong)加入用(yong)(yong)無血清1640按(an)5mg/ml新鮮配制(zhi)的(de)MTT溶(rong)液100μl,溫(wen)育(yu)4小時,使MTT還原為(wei)甲(jia) 月(yue)替,再次倒掉(diao)上清液,每(mei)孔(kong)加DMSO(二甲(jia)基亞楓(feng))200μl,用(yong)(yong)平板搖床(chuang)搖勻后,使用(yong)(yong)酶標儀測(ce)(ce)定光密度值(OD)(參(can)考(kao)波(bo)長(chang)450nm,檢測(ce)(ce)波(bo)長(chang)570nm),以溶(rong)劑對照處理細胞為(wei)對照組,按(an)下述公式計算(suan)化(hua)合物對細胞的(de)抑制(zhi)率,并按(an)中(zhong)效方(fang)程計算(suan)半數抑制(zhi)濃度IC50:

客戶方需提供:

樣本描述,相關的實驗設(she)計內容(rong)如作(zuo)用時間和樣本濃度等。

公司方提供:

實(shi)驗結果IC50值。

實驗周期與費用:

實(shi)(shi)驗(yan)費(fei)用(yong)以樣本數和細胞株的種類(lei)數目為(wei)單位(wei)計算,實(shi)(shi)驗(yan)周期(qi)為(wei)18個工(gong)作(zuo)日(ri),公(gong)司將在(zai)材料和預付的實(shi)(shi)驗(yan)經費(fei)全部到位(wei)后(hou)25個工(gong)作(zuo)日(ri)之內提交實(shi)(shi)驗(yan)結果。客戶(hu)需在(zai)收到實(shi)(shi)驗(yan)結果后(hou)一周內付清(qing)所有剩余款項(xiang)。

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